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日粮添加Arg或NCG对妊娠后期母猪繁殖和胎盘eNOS、VEGFA和PIGF1基因表达的影响

发布时间:2016-08-16 关注:2639


摘要:本文旨在研究日粮中添加ArgNCG对母猪繁殖性能的影响。试验选用27头体重接近、妊娠期相同(90d±1)的杂交母猪(长白×大白),随机分为3组(n=9),分别为对照组、Arg组和NCG组,三组分别采食基础日粮、添加1%Arg0.1%NCG的基础日粮结果表明:1)与对照组相比,Arg组和NCG组所有活仔的平均初生重分别提高16.2%14.3%P<0.05<>);Arg组血浆中VEGFA的浓度较高(P<0.05<>)。2)与对照组相比,NCG组尿囊绒膜组织的VEGFA表达量更高(P<0.01<>),Arg组VEGFA的表达量有增高趋势(0.05<<>P<0.1<>)。3)与对照组相比,NCG组血浆PIFG1蛋白浓度显著升高(P<0.05<>),加快了胎盘尿囊绒膜组织PIGF1的表达(P<0.01<>)。本研究结果表明,日粮添加Arg和NCG在改善胎盘血管功能和提高胎儿营养供应方面发挥重要作用。

1.引言

母猪的产仔数在过去的几十年得到很大的提高。然而,更多的胎儿数量和更高的胎儿生长率要求更多的营养供应,以维持母猪和胎儿特别是妊娠后期的营养需要。妊娠期间较高的胚胎损失和胎儿死亡率限了母猪的产仔数。胎盘在胎儿的生长和发育中起重要作用,它能够维持胎儿生长发育的血流需要。因此,血管生成和血管再生对于正常的胎盘功能和胚胎/胎儿的生长发育至关重要。一般而言,血管再生过程由生长因子,如血管内皮生长因子(VEGFA)或者胎盘生长因子1PIGF1)启动。VEGFA促进绒毛芯间质细胞分化为血管干细胞,主要调节血管的生成和再生过程。作为一种强力的内皮存活因子,VEGF促进NO的产生,进而诱导血管舒张和促进血流,同时也是增加PIGF1内皮通透性作用的强力促进剂。

  L-Arg是仔猪的必需氨基酸,特别是在应激条件下。作为NO、多胺、肌酸、胍基丁胺和蛋白质合成的底物,Arg在治疗人类和动物的发育和许多健康问题上发挥重要的作用。此外,Arg还能提高猪的繁殖性能,调节血管生成,增加Arg的内源合成并提高母猪的产仔数。

早期研究发现ArgNCG能够提高母猪妊娠后期的繁殖性能,且ArgeNOSVEGFAPIGF1等基因起到重要作用。因此,我们假设日粮补充Arg或者NCG能够改善母猪的繁殖性质,其潜在机制是影响胎盘的PIGF1VEGFAeNOS等目标基因表达以调节胎盘的功能。

2.材料与方法

2.1动物与实验设计

试验选用体重(187±5kg)、胎次(3.2±0.7)、上胎产仔数接近,妊娠90d的杂交母猪(长白×大白)27头,随机分成3组。对照组饲喂玉米豆粕型基础日粮,Arg组和NCG组在基础日粮中分别添加1.0%L-ArgHcl0.1%NCG。在整个妊娠期间,母猪每天提供2.0kg日粮(08:0016:30)。所有母猪提供13.5MJ/kg14.7%粗蛋白,自由饮水。记录窝重,并对血样进行生化分析。母猪分娩后立即收集胎盘绒毛膜尿囊膜组织,并加入RNA稳定剂,用RT-PCR法测定内皮一氧化氮合酶(eNOS)、血管内皮生长因子aVEGFA)和胎盘生长因子1PIGF1)的mRNA

2.2数据分析

数据采用平均值±标准误表示,基因和miRNAs表达的数据用GLM程序分析,其他数据用单因子ANOVASAS9.1.3)分析,P0.050.05P0.1作为差异显著性判断标准。

试验结果

3.1产仔数

日粮中NCG和精氨酸水平对成活率和初生重的影响

项目

对照组

Arg

NCG

标准误

窝产仔数,n

10.65

11.12

11.06

0.22

窝产活仔数,n

9.26

10.76

10.58

0.21

初生均重,n

1.41

1.56

1.55

0.05

初生活仔均重

1.46a

1.62b

1.59b

0.02

注:同行肩标不同,即差异显著(P<0.05<>);n=9

产仔数见表2。与对照组相比,Arg组和NCG组的活仔数都有升高趋势(0.05P<0.1);Arg组和NCG组的初生活仔窝重分别高16.2%14.3%Arg组和NCG组仔猪的初生个体重较高。
3.2血浆NONOS浓度

血浆NONOS的浓度见表3。与对照组相比,Arg组和NCG组的血浆NOiNOS有升高趋势(0.05P0.1)。

精氨酸和NCG对妊娠母猪血浆中NONOS浓度的影响

项目

对照组

Arg

NCG

标准误

NO(μmol/L

176.25c

200.36ab

243.33a

26.21

NOS(U/L)

1.72

1.71

1.60

0.12

诱导型NOSU/mL

6.19bc

6.61ab

7.07a

0.36

注:同行肩标不同即差异显著(P<0.05<>)

3.3血浆eNOSVEGFAPIGF1蛋白浓度

Arg组(P<0.05<>)和NCG组(P<0.1<>)的eNOS蛋白浓度均低于对照组(图1)。与对照组相比,精氨酸组VEGFA蛋白浓度较高(P<0.05<>),NCG组有升高趋势(P>0.05)。NCG组血浆中PIGF1浓度显著高于Arg组和对照组(P<0.05)。




精氨酸和NO对妊娠母猪血浆中eNOSVEGFAPlGF1蛋白浓度的影响。数据用平均值±平均差(n=9)。*P<0.05或者**P<0.01(ANOVA)表示差异显著。

3.4胎盘尿囊绒膜组织eNOSVEGFAPIGF1基因表达

与对照组相比,Arg组和NCG组的eNOS表达都有增加的趋势(0.05P0.1),NCGVEGFA表达更高(P0.05),Arg组有增高的趋势(0.05P0.1)。NCG组的PIGF1表达极显著高于Arg组(P0.01),显著高于对照组(P0.05)。





2 ArgNCG对胎盘尿囊绒膜eNOSVEGFAPIGF1基因表达的影响。数据用平均值±平均差(n=9)。*P<0.05或者**P<0.01(ANOVA)表示差异显著。

结论

本研究表明,ArgNCG均能提高窝重和胎儿存活率可能与胎盘表面血管eNOSVEGFPIGF1基因表达升高这条机制相关。

参考文献:略


注:本文摘译自《Effect of dietary arginine and N-carbamoylglutamate supplementation on reproduction and gene expression of eNOS, VEGFA AND PIGF1 inplacenta in late pregnancy of sows》,该文发表于Animal Reproduction Science 1322012187-192.

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